科普|间充质干细胞

2019-04-30 友康视点

【间充质干细胞定义】

间充质干细胞(MSC, mesenchymal stem cells)泛指一类存在于骨髓、脂肪组织、脐带、胎盘等位置的一系列能够贴附在塑料表面生长、具有一定分化潜能的细胞群。
MSC是干细胞家族的重要成员,来源于发育早期的中胚层,存在于基质中,属于多能干细胞,MSC最初在骨髓中发现,具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控和自我复制等特点;并且可以分化成多种组织。

【间充质干细胞最低标准】

2006年, ISCT提出鉴定人来源间充质干细胞的3条最低标准:
①在标准培养条件下,间充质干细胞具备在塑料底物的贴附性。
②间充质干细胞群体表达CD105CD73CD90,而不表达CD45CD34CD14CD11bCD79aCD19HLA-DR表面分子。
③经体外诱导,间充质干细胞能向成骨细胞、脂肪细胞及软骨细胞分化。
 
可以通过茜素红染色和Von Kossa染色判断分化为成骨细胞;
 
可以通过油红O染色判断分化为脂肪细胞;
 
可以通过阿利新蓝染色或免疫组化染色判断分化为成软骨细胞。

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【间充质干细胞的获取来源】
 间充质干细胞已经证明可以从胎盘、脂肪组织、骨髓、脐血、来自脐带的华通氏胶和牙齿(牙髓和牙周韧带的血管周围龛)等中分离。

【间充质干细胞的获取方法】

1、酶消化法:胎盘、脂肪组织、骨髓、脐带和牙齿;

2、脐带、羊膜、脂肪等组织一般先采用各种酶(胶原酶和胰酶等)消化、分离组织中的有核细胞、然后通过贴壁法进一步分离纯化MSC。
缺点:酶消化法获得的细胞纯度略低、状态不均一、部分可能因消化酶的损伤无法贴壁生长。

3、组织块法:脐带、骨髓
组织贴壁培养法得到的细胞纯度较高,对细胞伤害小,操作相对简单,将组织块剪碎、贴壁后加培养基培养即可。组织块培养法收获的原代细胞产量比酶消化法要多且成功率高,且降低了培养的成本和难度,避免了培养中异种蛋白的混入,从而降低了临床排斥反应。
缺点:原代培养所需周期较长、获得细胞数量相对有限。

4、密度梯度离心:骨髓、外周血和脐血
骨髓、外周血和脐血等主要先用PercollFicoll离心方法分离单个核细胞,然后用贴壁法进一步分离纯化间充质干细胞。
改进密度梯度离心法,可提高骨髓源间充质干细胞的分离效率和富集。

采用直接全骨髓贴壁法分离间充质干细胞需要比较高的接种密度。

【间充质干细胞的临床应用】

脐带间充质干细胞临床研究涵盖糖尿病、糖尿病并发症、类风湿关节炎、脊髓损伤、脑梗死、脑瘫、帕金森病、治疗骨发生疾病、心脏病、脑卒中、肝病和肿瘤、难治性肺病和不孕不育等多种疾病,有望为这些疾病提供全新的治疗途径。

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